Radiolabelling, etichettatura enzimatica, etichettatura luminescente, etichettatura fluorescente e tecniche di etichettatura immunogold sono tutti esempi di tecniche di dosaggio immunologico etichettate.
1. Saggio immunologico etichettato di materiali radioattivi
Yalow e Berson hanno inventato il radioimmunoassay (RIA) nel 1959, un approccio rivoluzionario che combina la tecnologia di tracciante radionuclidi con alta sensibilità e tecnologia immunochimica specifica.
L'approccio immunotassay etichettato sfrutta l'effetto di amplificazione del marcatore di nuclidi per aumentare il limite inferiore di rilevamento del materiale in esame, impiegando anticorpi o antigeni come reagenti leganti, migliorando notevolmente la specificità del test.
2. Saggio immunologico etichettato utilizzando etichette fluorescenti
Conn et al. ha sviluppato il saggio immunologico con etichetta fluorescente (FIA) negli anni '40. L'antigene o l'anticorpo è etichettato con un materiale fluorescente che si lega all'antigene o all'anticorpo appropriato e l'intensità della fluorescenza viene misurata utilizzando un microscopio fluorescente o un'irradiazione UV. Il test immunologico con etichetta fluorescente è una tecnica per misurare l'intensità della fluorescenza e la fluorescenza utilizzando un microscopio fluorescente o una luce UV.
Sebbene l'approccio del saggio immunologico etichettato con fluorescenza sia molto sensibile, la fluoresceina può essere fisiologicamente pericolosa, riducendo la sensibilità e la selettività dell'anticorpo o dell'antigene.
3. Tecnica di immunodosaggio etichettata con etichettatura enzimatica
Dopo la tecnica dell'anticorpo immunofluorescente e il test radioimmunologico, è una nuova tecnica sierologica chiave. Nel 1966, Nakane et al. e Avromeas et al. ha riferito di aver utilizzato enzimi invece di anticorpi etichettati con fluoresceina per sviluppare l'approccio anticorpo etichettato con enzimi (tecnica anticorpale con etichetta enzimatica) per la localizzazione e l'identificazione degli antigeni nei tessuti biologici, rispettivamente.
Engvall Van Weemen et al. ha pubblicato il test di immunoassorbimento etichettato con enzimi nel 1971, rendendo gli anticorpi etichettati con enzimi quantitativamente rilevabili per la prima volta.
Tecniche di immunotrasferimento basate su anticorpi marcati con enzimi sono state create negli anni '80 per il rilevamento e l'identificazione di molecole proteiche.
Le tecniche di etichettatura immunoenzimatica sono ora ampiamente impiegate nella ricerca di immunodiagnosi, rilevamento e biologia molecolare.
4. immunodosaggio etichettato con etichettatura luminescente
Le nazioni straniere hanno iniziato a utilizzare sostanze chimiche chemiluminescenti per contrassegnare antigeni o anticorpi intorno alla fine degli anni '80, con conseguente sviluppo della tecnologia di immunodosaggio a luminescenza.
Luminescence immunoassay (LIA) è un termine che si riferisce al saggio immunoterapico di chemiluminescenza (Chemiluminescence immunoassay, CLIA).
Inoltre, sono disponibili anche test immunologici di elettrochemiluminescenza e immunodosaggi di chemiluminescenza amplificati con enzimi (ECLIA).
CLIA è stato sviluppato da Sohrocler e Halman alla fine degli anni '70 e combina l'elevata sensibilità della luminescenza con la specificità di un test immunologico. Il principio di base dello stesso saggio di etichettatura enzimatica è l'uso di reagenti di reazione chemiluminescenti (possono essere luminol o catalizzatori, ecc.) Etichettato antigene o anticorpo, antigene etichettato e anticorpo, e da testare dopo una serie di reazioni immunitarie, fasi fisiche e chimiche (come separazione centrifuga, lavaggio, ecc.), E infine per determinare la forma di determinazione dell'intensità luminosa.
5. Saggio immunologico etichettato utilizzando particelle superparamagnetiche
Il test immunocromatofrafico magnetico (MICT) è un mix di fisica attuale e biotecnologia originariamente impiegato nel campo della medicina di base per creare e costruire test magnetici [13,14].
A differenza di altre tecniche di etichettatura, l'etichettatura delle particelle magnetiche non è influenzata dalle impurità colorate, consentendo di essere utilizzata per quantificare direttamente sostanze colorate come sangue, cibo e liquami. La premessa è che le nanoparticelle superparamagnetiche vengono utilizzate come marcatori, e l'impatto del campo magnetico locale delle particelle magnetiche attaccate al complesso immunitario viene monitorato da un apparato di rilevamento magnetico molto sensibile per produrre un risultato quantitativo dell'analita in esame.
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