1. il "gold standard" per il kit di rilevamento rapido anticorpo neutralizzante
Il rilevamento degli anticorpi neutralizzanti è uno degli indicatori importanti nel processo di sviluppo del vaccino e valutazione clinica. Il gold standard di laboratorio per neutralizzare il rilevamento degli anticorpi è il test di inibizione delle infezioni, che include principalmente un test di neutralizzazione della riduzione della placca utilizzando un corpo vivente e un test di neutralizzazione delle cellule traccia per l'analisi rilevando variabili citopiche.
Entrambi questi due metodi utilizzano diluizioni quantitative vive e diverse di uguale quantità di siero per inoculare cellule monostrato pre-preparate e valutare il grado di patologia cellulare e titoli anticorpali neutralizzanti attraverso diversi indicatori. I saggi di neutralizzazione che utilizzano colture in vitro vivi riflettono i titoli degli anticorpi neutralizzanti totali in grado di bloccare l'infezione nei campioni di sangue umano.
2. Standardizzazione dei metodi di rilevamento per neutralizzare i kit di rilevamento degli anticorpi
I metodi di rilevamento degli anticorpi neutralizzanti devono passare attraverso un rigoroso processo di standardizzazione e un'adeguata valutazione delle prestazioni e determinare il basso livello di protezione stabilendo un valore di cut-off adatto per stabilire una correlazione con il potere protettivo. Ad esempio, il vaccino antinfluenzale relativamente maturo, il vaccino EV71, il vaccino antirabbico, il vaccino antipolio, ecc., Hanno stabilito test anticorpali neutralizzanti standardizzati riconosciuti dall'OMS, e hanno prodotti standard dell'OMS corrispondenti e ceppi standard raccomandati. Viene impostato un valore di cut-off chiaro. Per altri vaccini, anche se non esiste un metodo di riferimento riconosciuto a livello internazionale, ogni produttore di vaccini deve stabilire un metodo di prova relativamente standardizzato per neutralizzare gli anticorpi.
Inoltre, per le malattie infettive gravi emergenti, a causa della limitazione della fonte di ceppi vivi e della necessità di operare in laboratori di biosicurezza di alto livello, sempre più laboratori hanno iniziato a sviluppare metodi di coltura pseudo-cellulare per rilevare anticorpi neutralizzanti. La struttura proteica pseudomembrana nel metodo è simile a quella del corpo vivente e non richiede un laboratorio di biosicurezza di alto livello. L'operazione è semplice e i risultati sono giudicati oggettivamente. Tuttavia, il metodo deve anche essere standardizzato e dovrebbe essere verificato con il metodo della cultura dal vivo.
Gli esperti ritengono ampiamente che i suddetti test PRNT, CPE e pseudo-neutralizzazione siano i tre metodi di rilevamento degli anticorpi neutralizzanti comunemente usati e classici nella valutazione dei vaccini. Metodologicamente valido, ma richiede un rigoroso processo di standardizzazione.
In risposta, molti istituti di ricerca e società di produzione nazionali e straniere stanno lavorando a metodi di rilevamento degli anticorpi neutralizzanti vivi o falsi, compresi i laboratori dell'OMS. Tuttavia, a causa del periodo limitato di sviluppo del vaccino, la ricerca di base pertinente è ancora insufficiente. Insieme alla continua comparsa di ceppi mutanti, finora non sono stati stabiliti metodi standardizzati di test degli anticorpi neutralizzanti; ci sono anche notevoli differenze tra i metodi di prova stabiliti da varie istituzioni.
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