Il test della workstation ELISA è stato ampiamente utilizzato clinicamente a causa della sua alta sensibilità e buona specificità. Tuttavia, ogni collegamento nell'operazione ha un impatto maggiore sull'effetto di rilevamento del test. Se non si presta attenzione, può portare a resa cromatica incompleta, patterning e altri risultati. Riassumiamo le cause e le soluzioni dei problemi che spesso si verificano in ogni collegamento dell'operazione come segue, sperando di darti qualche ispirazione e migliorare la qualità dell'esperimento.
Barcazioni. Selezione dei reagenti per ELISA completamente automatizzato
Selezionare reagenti di rilevamento di alta qualità perELISA completamente automatizzatoE operare in stretta conformità con le istruzioni. Prima dell'operazione, equilibrare i reagenti a temperatura ambiente per 30-60 minuti.
Tor. Il caricamento del campione di ELISA completamente automatizzato
1. Possibili motivi:
(1) Se la separazione dei campioni di siero o plasma non è buona, aggiungere campioni;
(2) Nel funzionamento manuale, troppe piastre campione causeranno tempi di attesa troppo lunghi prima di mettere il campione nell'incubatore (specialmente quando la temperatura interna è alta);
(3) Dopo aver aggiunto il campione e aggiunto il reagente enzimatico, l'enzima è schizzato fuori dal foro.
2. Soluzione:
(1) L'esemplare è siero: è meglio immagazzinare naturalmente il sangue per 1-2 ore e poi centrifugare a 3000 rpm per 15 minuti;
Il campione è al plasma: deve essere utilizzato un tubo di raccolta di campioni di sangue contenente anticoagulante e il tubo di raccolta del sangue deve essere invertito e miscelato 5-10 volte immediatamente dopo la raccolta del sangue. Dopo un periodo di tempo, centrifugare a 3000 rpm per 15 minuti;
Se viene testato entro pochi giorni, può essere messo in frigorifero a 2-8 ° C e se deve essere conservato, può essere collocato in un frigorifero a bassa temperatura a-20 °C.
(2) Metti il campione nell'incubatrice in tempo dopo aver aggiunto il campione.
(3) Dopo aver aggiunto il reagente enzimatico, asciugare la superficie della piastra di microtitter con carta assorbente.
(4) Se viene utilizzata AT o altra aggiunta automatica del campione, è meglio scegliere FAME o altri strumenti di post-elaborazione per aggiungere reagenti enzimatici.
(5) Quando ci sono molti esemplari, si prega di operare in lotti.
Ⅲ. Incubazione di ELISA completamente automatizzato
1. Possibili motivi:
(1) Non c' è copertura o copertura durante l'incubazione, in modo che l'esemplare o il diluente evapori e si adsorbi alla parete del foro, rendendo difficile pulire a fondo;
(2) Il tempo di incubazione è artificialmente prolungato, con conseguente legame non specifico strettamente attorno al pozzo di reazione, rendendo difficile la pulizia completa.
2. Soluzione:
(1) Allegare un foglio di copertura o una copertina;
(2) Controllare rigorosamente il tempo di funzionamento secondo le istruzioni.
Ⅳ. La piastra di lavaggio di ELISA completamente automatizzata
1. Possibili motivi:
(1) Lavare manualmente la piastra e il liquido attraversa i fori;
(2) Quando la lavatrice semiautomatica viene utilizzata per lavare le piastre, la quantità di liquido di lavaggio è insufficiente, il che porta al lavaggio incompleto della piastra; l'intasamento dell'ago di lavaggio della piastra provoca un'aspirazione incompleta; lo scarso lavaggio della piastra si traduce in uno scarso effetto di lavaggio della piastra;
(3) Troppe piastre di reazione causano lunghi tempi di attesa per le piastre di lavaggio.
2. Soluzione:
(1) Assicurarsi che la lozione riempia i fori e che l'ago di lavaggio sia sbloccato. Dopo aver lavato la piastra, è meglio asciugare delicatamente su carta assorbente (scegliere materiale assorbente pulito, non o meno polveroso);
(2) organizzare ragionevolmente, o utilizzare più rondella del piatto.
Ⅴ. Lo sviluppo del colore di ELISA completamente automatizzato
1. Possibili motivi:
(1) Lo sviluppatore è stato lasciato per troppo tempo dopo la preparazione o utilizzato uno sviluppatore scaduto;
(2) Quando lo sviluppatore viene aggiunto, schizza fuori dal foro e fa scorrere il liquido indietro.
2. Soluzione:
(1) Lo sviluppatore del colore deve essere preparato prima dell'uso il più possibile e lo sviluppatore del colore scaduto non deve essere utilizzato. Lo sviluppatore di colori TMB blu chiaro non viene utilizzato;
(2) impedire allo sviluppatore di fuoriuscire quando si aggiungono campioni;
(3) Il liquido A e B dovrebbe evitare il contatto con apparecchiature metalliche.
Ⅵ. Cessazione dell'ELISA completamente automatizzato
Possibile causa: ad esempio, vengono generate più bolle quando viene aggiunta la soluzione di arresto, con conseguente aumento dei falsi positivi. Pertanto, evitare bolle d'aria quando si aggiunge la soluzione di arresto.
Redisca. La lettura della lastra di ELISA completamente automatizzata
Se il fondo della piastra non è pulito quando si legge la piastra, assicurarsi che il piatto di microtitter sia pulito. Pertanto, nell'intero processo operativo, assicurarsi che la piastra ELISA non entri in contatto con l'acido ipocloroso e realizzare il più possibile l'automazione degli standard di test ELISA completamente automatici, che migliora efficacemente la qualità dei test. Inoltre, è importante scegliere un ELISA qualificatoFornitore di workstation.
Nell'effettivo funzionamento, oltre a selezionare buoni reagenti, le fasi dell'operazione devono essere seguite rigorosamente. Allo stesso tempo, dovremmo fare bene nel controllo di qualità dell'interno e nella valutazione esterna di qualità ed ispezionare ogni esemplare con uno stile rigoroso del lavoro per assicurare la qualità dell'ispezione. Oggigiorno, un certo numero di unità in Cina ha lettori di micropiastre completamente automatizzati, che hanno svolto un ruolo importante nella realizzazione di test standardizzati ELISA completamente automatizzati e nel miglioramento della qualità dei test.
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